| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 256-1 | ||||
Resumo:A detecção de Clostridioides (Clostridium) difficile já foi relatada em variadas espécies de animais silvestres, embora estudos relacionados a sua colonização e epidemiologia ainda sejam escassos. O Vale do Itajaí compreende uma rica biodiversidade, a qual se encontra ameaçada pela expansão de centros urbanos, de atividades agrícolas e da apreensão ilegal de animais da natureza, os quais podem representar fatores determinantes no isolamento desse patógeno. Diante do exposto, o objetivo deste estudo foi pesquisar C. difficile em amostras fecais de canários-da-terra (Sicalis flaveola) apreendidos de rinha no município de Gaspar e encaminhados ao Serviço de Atendimento de Animais Silvestres de Blumenau (SAASBlu) em 2022. Esse trabalho recebe apoio da Fundação de Amparo à Pesquisa e Inovação de Santa Catarina (FAPESC), protocolo 2021TR00193. Para isso, 100 amostras mantidas em 1mL de solução salina foram submetidas a um pré-tratamento com etanol a 99.5% (diluição 1:1), seguido pela centrifugação e repouso por 30/60 minutos da mistura, a fim de aumentar a recuperação de C. difficile. O sedimento criado foi semeado em ágar Brucella suplementado com 10% de sangue de cavalo, e caldo BHI (Brain Heart Infusion), sendo incubados por cinco a sete dias a 37ºC em anaerobiose. As colônias sugestivas foram avaliadas pela coloração de Gram e submetidas ao MALDI-TOF MS. A técnica de PCR foi adotada para confirmar a identificação dos isolados pela detecção de um fragmento do gene tpi (triose fosfato isomerase), e para pesquisa do gene da toxina B (qPCR). A partir das análises, foram isoladas espécies do gênero Clostridium spp., como C. beijerinckii (11%), C. diolis (6%) e C. disporicum (1%), além de outros gêneros de bactérias como Bacillus spp. (4%) e Paenibacillus spp. (2%), entretanto C. difficile não foi encontrado. Bacillus ssp. e Paenibacillus spp. são microrganismos benéficos aplicados em variadas atividades agrícolas e biotecnológicas, todavia, não há estudos que abordam o impacto da colonização em aves. Apesar do patógeno de interesse não ter sido isolado, os achados revelam o papel de animais silvestres como reservatórios de cepas do gênero. Todavia, são poucas as pesquisas que tratam da microbiota de aves, ainda mais espécie-específicas como de Sicalis flaveola, e que tenham como alvo Clostridium spp. Logo, a presença dessas espécies pode estar atrelada a exposição a ambientes humanos, a condições sanitárias precárias e a ambientes diversificados, visto que se trata de animais exclusivamente de cativeiro, porém adquiridos de forma ilegal e de rinha. O estudo representa uma importante iniciativa na pesquisa de espécies de Clostridia em animais silvestres, sendo necessárias análises mais aprofundadas, tal como do incremento de trabalhos com o mesmo viés. Palavras-chave: Canário-da-terra-verdadeiro, Clostridiales, Microbioma, Vida silvestre Agência de fomento:Fundação de Amparo à Pesquisa e Inovação de Santa Catarina (FAPESC) | |||||